透析胎牛血清(WINSERA,FBS500-WDF-002)
品牌:WINSERA®
規(guī)格:500ml
說明:該產品僅供科研使用
品牌:WINSERA®國內科研實驗室使用比較普遍,價格相對實惠,能滿足很多常規(guī)細胞的培養(yǎng)需求。
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胎牛血清的優(yōu)點
加濃度 5% 至 10% 的胎牛血清,為培養(yǎng)體系中的細胞(包括成纖維細胞)提供營養(yǎng)、附著因子和其他所需成分。血清還具有緩沖液的作用,可以減少 pH 值波動。血清中具有高含量的促生長因子,例如可最大限度地促進細胞生長的大分子和載體蛋白。由于胎牛血清 (FBS) 來源于胎牛,其抗體含量自然較低。因而成為常用的血清類型。
胎牛血清是在封閉的屠宰機構對未發(fā)育*的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品,牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清,新生牛血清以及(成年)牛血清,血清的成分及含量會隨年齡變化。而胎牛血清由于血清采集時間早,其胎球蛋白較多,并富含多種生長因子。同時,由于未接觸外界環(huán)境,胎牛血清所含的內毒素、補體等細胞有害成分和抗體水平均是較低的。因此,胎牛血清從細胞培養(yǎng)的效果來看是優(yōu)質的牛血清制品,在細胞培養(yǎng)的應用較為廣泛。
胎牛血清 (FBS) 包含什么成分?
胎牛血清含有多種營養(yǎng)因子和大分子因子,例如氨基酸、脂質和糖類。胎牛血清的抗體含量非常低,而生長因子含量很高,因而可以優(yōu)化細胞培養(yǎng)過程。由于胎牛血清 (FBS) 的組分尚未*明確,因此各批次的成分可能不同。這種血清可能包含 1000 多種組分。
胎牛血清 (FBS) 產品有哪些類型?
胎牛血清產品的類型很多,因來源、加工和檢測而異。每一批血清都要先進行過濾,然后混合并分裝。該步驟即所謂的“真混合工藝",旨在確保每瓶血清之間均勻一致。該技術可以提高血清產品的一致性與質量。
業(yè)內通常會根據不同產地的牛疫情情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及優(yōu)質胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情,因此這些產地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為優(yōu)質胎牛血清。
胎牛血清 (FBS) 自不同國家或地區(qū)的血液。主要有三個類別:
優(yōu)級胎牛血清 (FBS):適合擔心細胞培養(yǎng)物可能受牛海綿狀腦病 (BSE) 污染的用戶。此類產品源自新西蘭和澳大利亞。
標準胎牛血清 (FBS):通常用于研究領域的常見細胞類型培養(yǎng)。
其他類型的胎牛血清產品包括:
特色產品,例如透析型胎牛血清 (FBS) 和經 USDA 進口測試的胎牛血清 (FBS)
專用產品,例如專門用于特定細胞培養(yǎng)的胚胎干細胞專用胎牛血清 (FBS) 和昆蟲細胞專用胎牛血清 (FBS)。
胎牛血清 (FBS) 在細胞培養(yǎng)中的常見用于以下領域的體外真核細胞培養(yǎng):
疫苗生產
生物技術研究與生產
干細胞研究
動物診斷
生物制藥
WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下:
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級胎牛血清 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現貨 |
特級胎牛血清 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現貨 |
ES級別胎牛血清 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現貨 |
AB血清 | HU050-S-011 | 50ML | 現貨 |
熱滅活胎牛血清 | FBS500-WH-002 | 500ML | 現貨 |
碳吸附胎牛血清 | FBS500-WCS-002 | 500ML | 現貨 |
透析胎牛血清 | FBS500-WDF-002 | 500ML | 現貨 |
超低IGg胎牛血清 | FBS500-WLG-002 | 500ML | 現貨 |
小鼠肝實質細胞 AML-12
小鼠氣道平滑肌細胞 ASMC
小鼠腦神經膠質母細胞 G422
小鼠精原細胞系 GC-1 spg
小鼠主動脈內皮細胞 MAEC
小鼠骨樣細胞 MLO-Y4
小鼠肺上皮細胞 MLE-12
小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞 IMCD3
小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1
小鼠乳腺癌細胞 4T1
小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標記 4T1+luc
小鼠巨噬細胞 Ana-1
小鼠黑色素瘤細胞 B16
小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10
小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記 B16-F10+LUC
小鼠原B細胞株 BAF3
小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31
小鼠腦微血管內皮細胞株 bEnd.3
小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞 Beta-TC-6
小鼠小膠質細胞 BV2
小鼠神經干細胞 C17.2
小鼠成肌細胞 C2C12
小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2 Clone8
小鼠結腸癌細胞 CT26
小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 CT26+LUC
小鼠結腸癌細胞 CT26.WT
小鼠胚胎干細胞 E14
小鼠淋巴瘤細胞 EL-4
小鼠乳腺癌細胞 EMT6
小鼠膠質細胞瘤 GL-261
小鼠膠質細胞瘤熒光素酶標記 GL-261+luc
小鼠乳腺上皮細胞 HC11
小鼠肝癌細胞 HEPA1-6
小鼠肝癌細胞熒光素酶標記 HEPA1-6+LUC
小鼠海馬神經元細胞 HT22
小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8
小鼠單核巨噬細胞 J774A.1
小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2WT (K7M2-wt)
小鼠骨肉瘤成骨細胞熒光素酶標記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC
小鼠肺癌細胞 LLC
小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC
小鼠淋巴瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)
小鼠成纖維細胞 L929
小鼠胰腺癌細胞 LTPA
小鼠乳腺癌高轉移細胞 MA-891
小鼠膀胱癌細胞 MB49
小鼠結腸癌細胞 MC38
小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 MC38+LUC
小鼠胚胎成骨細胞 MC3T3-E1
小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14
小鼠胚胎成纖維細胞 MEF
小鼠胚胎成纖維細胞 MEF(絲霉素C處理)
小鼠前胃癌細胞 MFC
小鼠正常肝細胞 NCTC1469(NCTC CLONE 1469)
小鼠腦神經瘤細胞 neuro-2a
小鼠胚胎細胞 NIH/3T3
小鼠骨髓基質細胞 OP9
小鼠雜交瘤(抗CD2)細胞 OKT11
小鼠畸胎瘤細胞 P19
小鼠白血病細胞 P388
小鼠肥大細胞瘤細胞 P815
小鼠源基于MLV-10A1逆轉錄病毒包裝細胞系 PT-67
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 RAW 264.7
小鼠視網膜神經節(jié)細胞 RGC-5
小鼠前列腺癌細胞 RM-1
小鼠雜交瘤 SDOW-17
小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0
小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0-Ag14
小鼠小腸內分泌細胞 STC-1
小鼠腎小球系膜細胞 SV40-MES-13
小鼠淋巴結內皮細胞 SVEC4-10
小鼠睪丸間質細胞 TM3
正常小鼠睪丸Sertoli細胞 TM4
小鼠子宮頸癌細胞 U14
小鼠淋巴瘤細胞 YAC-1
透析胎牛血清(WINSERA,FBS500-WDF-002)
Q1、如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
答:培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,選MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。
Q2、何時須更換培養(yǎng)基?
答:視細胞生長密度而定, 或遵照細胞株基本數據上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。
Q3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
答:不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
Q4、培養(yǎng)基是否有必要避光保存?
答:是的。培養(yǎng)基中的一些成分是對光敏感的,如HEPES、精氨酸和核黃素等。
Q5、為何培養(yǎng)基保存于4°C 冰箱中,顏色會偏暗紅色, 且pH值會越來越偏堿性?
答:培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整 pH 值。
Q6、貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基,在放置幾天后顏色變紫?
答:這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時,碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘,來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。
Q7、細胞培養(yǎng)基偶然被凍,可否繼續(xù)使用?
答:如果細胞培養(yǎng)基偶然被凍,可能會造成磷酸鹽或氨基酸的析出,您應該將其加熱至37°C熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產生。如果沒有沉淀產生,培養(yǎng)基可以正常使用,如果出現沉淀,只能丟棄這些培養(yǎng)基。
Q8、我觀察到培養(yǎng)基中存在沉淀,但pH值未改變。我該如何處理?
答:先確定培養(yǎng)基是否被冰凍過,如果有,可能會造成磷酸鹽或氨基酸的析出,嘗試將其加熱至37°C后通過搖動將沉淀溶解。如果仍有沉淀,請棄用此培養(yǎng)基。
Q9、我觀察到培養(yǎng)基中存在沉淀,pH值也發(fā)生改變。我該如何處理?
答:這最可能是細菌或真菌的污染信號。我們建議棄用培養(yǎng)基,同時嘗試對培養(yǎng)物進行去污染處理。
Q10、什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
答:酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
Q11、培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?
答:丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒有葡萄糖的話,細胞也可以代謝丙酮酸鈉。
Q12、L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
答:L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有最終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
Q13、培養(yǎng)基中HEPES的作用是什么?
答:HEPES(4乙磺酸)是一種常用的兩性離子緩沖液,在培養(yǎng)基中加入終濃度為10mM至25mM HEPES,可以提供額外的緩沖能力。防止培養(yǎng)中細胞的生長和代謝會導致培養(yǎng)基的環(huán)境pH值發(fā)生劇烈變化。
Q14、培養(yǎng)基及其它添加物和試劑可反復凍融嗎?
答:大部分添加物和試劑最多可以凍融3次,如果次數更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,將會影響它的性能。
Q15、二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎?使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么?
答:二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。
Q16、為什么要在溶解的一周內使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液?
答:胰蛋白酶在4℃就可能開始降解,如果在室溫下放置超過30分鐘,就會變得不穩(wěn)定。
Q17、CO2 培養(yǎng)箱中水盤作用?
答:培養(yǎng)箱中需要放入水盤保證培養(yǎng)環(huán)境的濕度,不然培養(yǎng)基中的水分很容易揮發(fā),使液體培養(yǎng)基濃縮,此外需要定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。
Q18、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
答:血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。如果需要更換血清,需要逐步替換(替換濃度由25%,50%,75%。100%逐步進行),讓細胞有一個適應過程,如果直接替換容易造成培養(yǎng)細胞的死亡。
Q19、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
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