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市場(chǎng)上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,使人難以分辨真?zhèn)渭捌焚|(zhì)。好不容易在眾多品牌中挑選出誠心如意的產(chǎn)品后,那我們就可以安心使用了嘛?
不盡然,我們匯總小伙伴經(jīng)常咨詢的一些問題。
1、為何上次購買的同一貨號(hào)的血清培養(yǎng)細(xì)胞狀態(tài)差異那么大?如何避免此影響?
答:因?yàn)檠鍋碓从趧?dòng)物,其組成成分有1000種左右,每個(gè)批號(hào)的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。
為了避免批間差異對(duì)細(xì)胞的影響,建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試,篩選合適的批號(hào),備好庫存(血清未開封時(shí),在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。
2、我購買的血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預(yù)防和處理沉淀?
答:血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。
造成沉淀的另一個(gè)原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。
預(yù)防措施與建議:因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下
3、如何減少沉淀物的產(chǎn)生?
答:我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作:·解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃ 至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至 37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
·解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生
·請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
·血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,則毋須做此步驟。
·若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
4、需要對(duì)新買的血清進(jìn)行過濾嗎?
答:不需要,血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1μm過濾,出廠經(jīng)過檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無菌檢測(cè),污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè),結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾。
5、如何解凍血清?
答:血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕規(guī)律搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。