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ELISA Kit 的誕生,是為了幫助科研工作者省掉繁瑣的實(shí)驗(yàn)過程,提高科研效率。如果選對了試劑盒,用對了實(shí)驗(yàn)技巧,就會讓您的實(shí)驗(yàn)效率事半功倍。
市場上各種廠家、品牌,各種種屬、因子,質(zhì)量良莠不齊,如何浪里淘金,選擇既符合研究需求,又品質(zhì)上乘的 ELISA 試劑盒呢?
大師兄教你 12 招,挑選合適 ELISA 試劑盒
1、查找待測樣本的蛋白濃度
可以通過 NCBI 的文獻(xiàn),uniprot,pax-dab 上給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致
2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類
除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用
3、試劑盒的檢測范圍
也就是標(biāo)曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標(biāo)曲范圍內(nèi),對于濃度很高的樣本,可以先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本
4、試劑盒中的稀釋線性及回收率
a. 稀釋線性:一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的較好稀釋倍數(shù)
b. 稀釋線性也有做加標(biāo)稀釋線性的情況,加標(biāo)稀釋線性是將標(biāo)準(zhǔn)品加入樣本中測定加入的標(biāo)準(zhǔn)品濃度測定是否準(zhǔn)確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數(shù)的參考指標(biāo)。一般線性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適
5、試劑盒的其它指標(biāo)
a. 靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本較低濃度的能力,如果待檢指標(biāo)含量很低,需要選擇高靈敏度的 ELISA 試劑盒
b. 板間和板內(nèi)的變異系數(shù)(CV%): 反映板內(nèi)和不同板之間是否均勻,CV% 一般小于 10% 比較好
6、試劑盒的有效期
試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準(zhǔn)備時間需要考慮到試劑盒的有效期
7、試劑盒的特異性
ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分,抗體對有關(guān)。若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗
8、重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般 ELISA 試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在 11% 和 15% 以內(nèi)
9、簡便性
試劑盒在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實(shí)驗(yàn)時間越短,操作越便利,越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個指標(biāo)
10、經(jīng)濟(jì)性
進(jìn)口分裝試劑盒因?yàn)槭∪ゲ簧傥锪骱蛨箨P(guān)費(fèi)用,與國外*試劑相比價格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格,特別是 48T 等小包裝,目前很多客戶因?yàn)閷ζ放频男湃味葐栴},主要還是選擇國外*,但是國內(nèi)進(jìn)口分裝比較成熟的公司仍然是一個非常好的選擇
11、美譽(yù)度
一個品牌不光要有度,更重要的是美譽(yù)度。通過行業(yè)調(diào)查公司以及網(wǎng)絡(luò),相關(guān)宣傳資料等可以找到美譽(yù)度高的 ELISA 試劑盒供應(yīng)商,這個反映的不僅是產(chǎn)品質(zhì)量的問題,對供應(yīng)商的售前售后服務(wù)也是一個非常嚴(yán)格的檢驗(yàn)
12、文獻(xiàn)引用
產(chǎn)品的文獻(xiàn)引用特別是高質(zhì)量的 SCI 文章的引用是很多用戶都關(guān)心的問題,這是業(yè)界對產(chǎn)品認(rèn)可的一個非常重要指標(biāo),而且對相關(guān)用戶的科研有一定的借鑒作用