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蘇州千舍生物教你如何查詢細(xì)胞資料和培養(yǎng)基相關(guān)知識(shí)
培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中*的營養(yǎng)成分,但是基礎(chǔ)的培養(yǎng)基卻給實(shí)驗(yàn)者帶來了一系列的問題。
別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。
1.怎樣查到一個(gè)特定細(xì)胞株的相關(guān)知識(shí)和培養(yǎng)條件?
ATCC(American Type Culture Collection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cells and hybridomas鏈接,輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述,包括細(xì)胞的來源,培養(yǎng)和凍存條件,以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。或者在鏈接web.expasy.org/cellosaurus/ 中輸入細(xì)胞代號(hào)查詢相關(guān)資料。
2.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣容易生長??傊?,shou 選MEM、DMEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng);RPMI1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng);各種目的無血清培養(yǎng)shou 選AIMV培養(yǎng)基SFM。新的細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要詳查資料。
3.自己新配制的液體培養(yǎng)基能保存多久?
我們建議將新配制的培養(yǎng)基放置于4℃,避光保存盡量在一周內(nèi)使用完畢。培養(yǎng)基越新鮮越好。
4.培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在一到兩周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
5.培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除了特殊篩選系統(tǒng)外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
為防止細(xì)菌、真菌污染,可以加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液,其培養(yǎng)基中的終濃度為青霉素100U/ml,鏈霉素為100ug/ml。
6.液體培養(yǎng)基可以放-20℃保存嗎?
不可以!因?yàn)樵?20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有的鹽可能無法重新溶解,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓降低,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),細(xì)胞容易破裂而死亡。
7.為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,顏色會(huì)偏暗紅色,且pH值越來越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中, 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會(huì)逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果, 將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí), 可以通入無菌過濾之CO2, 以調(diào)整pH 值。
8.為什么你公司液體培養(yǎng)基1640顏色發(fā)黃,是pH值不對(duì)嗎?
不是。因?yàn)榕浞皆颍?640為堿酚紅型,其中酚紅的濃度只有DMEM的四分之一,所以是因?yàn)榉蛹t濃度低,而非PH值低。
9.培養(yǎng)液pH是怎樣影響細(xì)胞生長的?
由于大多數(shù)細(xì)胞適宜PH值為7.2-7.4,偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生有害的影響。各種細(xì)胞對(duì)PH值要求也不*相同,原代細(xì)胞培養(yǎng)一般對(duì)PH值變動(dòng)耐受差,無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。 但總體來說,細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些,偏酸環(huán)境中更有利于細(xì)胞的生長。因此,配制培養(yǎng)用液時(shí)可把液體的PH值稍微調(diào)的偏酸一些。液體在經(jīng)過0.1um或0.2um濾膜過濾時(shí),PH值會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。
10.培養(yǎng)液滲透壓是怎樣影響細(xì)胞生長的?
當(dāng)細(xì)胞內(nèi)、外環(huán)境的分子濃度不同時(shí)就會(huì)產(chǎn)生滲透壓。這種情況下,水分通過滲透流入或流出細(xì)胞,從而改變細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境。高滲透壓迫使水分從細(xì)胞中擴(kuò)散出來導(dǎo)致細(xì)胞收縮,這種情況會(huì)使DNA和蛋白遭到破壞,細(xì)胞周期停滯以及終使細(xì)胞死亡;反之,低滲透壓使水分流入細(xì)胞內(nèi),使細(xì)胞腫脹破裂。
11.為什么有客戶要求培養(yǎng)基中不含酚紅?
研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),細(xì)胞培養(yǎng),尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí),不使用加酚紅的培養(yǎng)基。
12.酚紅的作用是什么?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。
13.你公司干粉培養(yǎng)基里含NaHCO3嗎?
所有的干粉培養(yǎng)基中都不含NaHCO3 。請依據(jù)說明書或包裝袋上的標(biāo)注,在干粉培養(yǎng)基*溶解后添加NaHCO3 。
14.NaHCO3的作用是什么?
與CO2一起形成緩沖系統(tǒng),保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定。
15.我們實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱CO2濃度一直以來都是5%,這樣可以嗎?
當(dāng)然不可以,不同的培養(yǎng)基要求添加NaHCO3的量不一樣,如DMEM要求添加3.7g/L,為了保持PH值穩(wěn)定,必須用高濃度的CO2平衡,一般不低于8%,而1640等要求添加NaHCO3 2.2g/L,還有些培養(yǎng)基要求添加更少,那么這些培養(yǎng)基就要求較低的濃度平衡,一般是5%。
16.培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是如果沒有葡萄糖的話,細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。
丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,-20℃保存,培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.
17.谷氨酰胺的作用是什么?
幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。
18.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基?
不能??!每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基,細(xì)胞大多無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。
我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!
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MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株
HCT8/5-fu 人回腸直腸腺癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
LOVO/5-FU 人結(jié)腸癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
HCT116/L人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞
HL60/ADR人早幼粒急性白血病細(xì)胞耐阿霉素株
PC9GR(PC9R)人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼
LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞阿霉素耐藥株
HNE1/DDP人鼻咽癌細(xì)胞順鉑耐藥株
SGC7901/5-fu人胃癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
A549/DDP人肺癌細(xì)胞順鉑耐藥株
MCF-7/DDP人乳腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株
A549/ADR人肺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株
SKOV3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株
HELA/DDP人宮頸癌耐順鉑細(xì)胞株
3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞
Raw264.7小鼠單核巨噬白血病細(xì)胞
B16-F10小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)細(xì)胞
B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞
CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞
F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
MLE-12 小鼠肺泡上皮細(xì)胞
Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
BV2 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
DC2.4小鼠樹突狀細(xì)胞
U14 小鼠子宮頸癌細(xì)胞
M-NFS-60小鼠骨髓性白血病細(xì)胞
mMSC小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
HL-1小鼠心肌細(xì)胞
TM3 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞
k7m2.wt小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞
mc3t3 e1小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞
hepa1-6 小鼠肝癌細(xì)胞
SP2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系
MC38小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
mpc5小鼠足細(xì)胞
4T1 小鼠乳腺癌細(xì)胞
ANA-1小鼠巨噬細(xì)胞
TM4 小鼠睪丸支持細(xì)胞
STO 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
bend.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞
H9C2 大鼠心肌細(xì)胞
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
AR42J 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞
IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞
RT4-D6P2T 大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞
INS-1 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞
NRK-52E 大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞
BHK-21 倉鼠腎成纖維細(xì)胞
PK-15 豬腎細(xì)胞
Duckembyro 鴨胚胎成纖維細(xì)胞
vero 綠猴腎細(xì)胞
Hep3B人肝癌細(xì)胞
HPAC人胰腺癌細(xì)胞
HT-1376 人膀胱癌細(xì)胞
JAR 人胎盤絨毛癌細(xì)胞
KNS-89 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
LN229 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
LNCaP clone FGC 人前列腺癌細(xì)胞
MDA-KB2 人乳腺細(xì)胞
MDA-MB-361 人乳腺癌細(xì)胞
MET-5A 人膜間皮細(xì)胞
MGC-803 人胃癌細(xì)胞
NCI-H1650 人肺支氣管癌細(xì)胞
RT4 人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤
SK-N-MC 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞
SK-N-SH 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞
T98G 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
U251MG(KO) 人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
U266 人骨髓瘤細(xì)胞
VCAP 人前列腺癌細(xì)胞
hTERT-HPNE 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞
NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞
HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HEK293 人胚腎細(xì)胞
HEPG2 人肝癌細(xì)胞
HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化)
HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
KYSE150人食道癌細(xì)胞
L02(HL7702)人正常肝細(xì)胞
LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞
MCF-10A人正常乳腺上皮細(xì)胞
MCF7人乳腺癌細(xì)胞
LX-2 人肝星狀細(xì)胞
MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞
Hyclone胎牛血清Sv30087.01
Hyclone胎牛血清Sv30087.02
Hyclone胎牛血清SH30084.03
Hyclone胎牛血清 SH30406.02
Hyclone胎牛血清 SH30406.05
Hyclone胎牛血清 SH30396.03
Hyclone胎牛血清 SH30070.03
Hyclone特級(jí)胎牛血清 SH30070.03E
Hyclone胎牛血清 SH30370.03
活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清,熱滅活 SH30068.03HI
馬血清SH30074.03
烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03
Hyclone胎牛血清SH30071.03
Hyclone胎牛血清SV30160.03
胎牛血清FBS SFBS
新生牛血清 SNCS
PAA 普通胎牛血清FBS A15-101
PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151
BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS
BI ES級(jí)別胎牛血清 04-002-1A
BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A
Corning胎牛血清 35-076-CV
PAN胎牛血清FBS P30-3302
PAN胎牛血清FBS ST30-3302
PAN ES級(jí)別胎牛血清 ST30-2602
PAN胎牛血清Plus ST30-3302P
NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE
Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108
Gemini特級(jí)胎牛血清 100-500
Gemini科研用人AB血清100-512
TCB胎牛血清 101ZC
Sigma 特級(jí)胎牛血清 F2442
Sigma正常人AB血清 H4522
SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1
胎牛血清10270-106、10099-141、10091-148、10099-133、10100-147、16010159、A31608-02、16050-122、30067334、10437-028等胎牛血清
雙抗 15140-122、SV30010
胰酶 25200-056、SH30042.01
GIBCO 胰酶 25200-072
DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT
DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT
PBS C10010500BT
1640培養(yǎng)基 C11875500BT
DMEM/F12 C11330500BT
MEM培養(yǎng)基 C11095500BT
α-MEM C12571500BT
DMEM低糖 SH30021.01
DMEM高糖 SH30022.01、SH30243.01
DMEM/F-12 1:1 SH30023.01
MEM/EBSS SH30024.01
PBS緩沖液 SH30256.01
α-MEM SH30265.01
RPMI-1640 SH30809.01
DPBS SH30028.02