Bovogen胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
1、可以起酸堿度緩沖液作用。
2、胎牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4、提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
5、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
6、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
要想Bovogen胎牛血清達(dá)到上述的這些*性能,那么需要有一個(gè)條件,就是在產(chǎn)品形成時(shí)一定要滿足相應(yīng)的胎牛血清質(zhì)量檢定指標(biāo)。
1、毒素檢測(cè):凝膠法和動(dòng)態(tài)濁度法 要求內(nèi)毒素含量≤10EU/ml。
2、化學(xué)檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白 (≤0.02%)。
3、微生物檢查:細(xì)菌和真菌——直接培養(yǎng)法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養(yǎng)法和DNA染色法 、牛病毒——細(xì)胞培養(yǎng)法。要求均為陰性。
4、Bovogen胎牛血清促細(xì)胞生長(zhǎng)測(cè)定:(SP2/0-Ag14標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定)
a.增殖濃度≥1.0×106個(gè)/ml、倍增時(shí)間≤20小時(shí) 克隆率=(陽(yáng)性孔平均數(shù)/培養(yǎng)孔總數(shù))×100%。
b.貼壁效率( VERO細(xì)胞、二倍體細(xì)胞等);10%血清――50或100個(gè)細(xì)胞/孔。
c.貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數(shù)/每孔存活的培養(yǎng)細(xì)胞平均數(shù))×100 相對(duì)貼壁效率=被測(cè)血清貼壁效率/參考血清貼壁效。